亮点

1、在α-半乳糖基神经酰胺（α-GalCer）诱导下，iNKT细胞与骨髓瘤细胞共培养，能够分泌高水平的抗肿瘤Th1型细胞因子，且这一过程依赖于CD1d的表达。

2、在α-GalCer诱导下，iNKT细胞对骨髓瘤细胞表现出较高的细胞毒性。

3、免疫调节药物来那度胺显著上调iNKT细胞的IFN-γ、IL-2生成，增强抗肿瘤活性。

多发性骨髓瘤（MM）是一种致命的血液恶性肿瘤，其特征表现为终末分化的浆细胞在患者骨髓中聚集。目前的治疗手段包括化疗和干细胞移植，但疗效并不令人满意。最近的研究表明，在对MM患者进行常规治疗后，可通过免疫疗法稳定甚至根除微小残留病灶，从而获得更好的临床疗效。

恒定自然杀伤T（iNKT）是CD1d限制性的先天类T细胞，在人体内表达恒定的Vα24-Jα18链。iNKT细胞在肿瘤免疫监视中发挥着重要生理学作用，临床前研究表明，iNKT细胞被CD1d的高度特异性配体α-半乳糖基神经酰胺（α-GalCer）激活后，可通过产生Th1细胞因子激发有效的抗肿瘤免疫反应。

无独有偶，近期一项题为Generation of Antitumor Invariant NKT Cell Lines in Multiple Myeloma and Promotion of Their Functions via Lenalidomide: A Strategy for Immunotherapy的研究表明，从MM患者体内分离的iNKT细胞能够产生高水平的Th1型细胞因子，表现出强烈的细胞毒性，并被传统治疗药物来那度胺激活，极大的增强了机体内抗肿瘤免疫反应，为多发性骨髓瘤的治疗提供可能。

首先，研究人员选取并分离了健康供体、新诊断的MM患者和晚期MM患者的原代 iNKT细胞系。其中，健康供体的iNKT细胞系建立成功率接近100%，而MM 患者的成功率为50%。从健康供体和MM患者建立的iNKT细胞系之间没有观察到明显的表型差异。

从健康供体和MM患者中建立iNKT细胞系

随后，为了评估这些iNKT细胞与骨髓瘤细胞之间潜在的体内相互作用，研究人员通过基因表达谱分析了原代MM细胞和MM细胞系的CD1d表达。有趣的是，他们发现与正常浆细胞相比，原代MM细胞表达高水平的CD1d，而MM细胞系则不表达CD1d，暗示着其不被iNKT细胞所识别。因此，研究人员建立了稳定的CD1d转染MM细胞系（MM1S.CD1d），以进行功能研究。

MM细胞表达CD1d及CD1d转染MM1S细胞系的建立

接下来，研究人员利用MM1S.CD1d细胞刺激iNKT细胞，检测其产生细胞因子的能力。值得注意的是，当仅与MM1S.CD1d细胞共培养时，iNKT细胞分泌的细胞因子（如IL-2、IFN-γ和IL-4）水平较低；然而，当用α-GalCer脉冲的MM1S.CD1d细胞共培养后，iNKT细胞分泌高水平的IFN-γ、IL-2，和低水平的IL-4。这说明在α-GalCer刺激下，iNKT细胞表现出Th1型抗肿瘤细胞因子特征。

iNKT细胞产生抗肿瘤Th1型细胞因子

那么，前文提到的CD1d阳性原代MM细胞是否也能介导iNKT细胞系的活化呢？

果不其然，与MM1S.CD1d细胞系的结果相一致，在α-GalCer脉冲原代MM细胞存在的情况下，iNKT细胞的IFN-γ产生量显著增加；甚至在去除α-GalCer后，iNKT细胞与原代MM细胞共培养也观察到了IFN-γ的产生。这更充分地表明了MM细胞能够呈递抗原以激活iNKT细胞，从而诱导抗肿瘤反应。

CD1d+原代MM细胞呈递抗原以激活iNKT细胞系

众所周知，来那度胺能够诱导细胞凋亡，减少骨髓瘤细胞与骨髓中基质细胞的结合，抑制血管生成，被批准用于治疗MM。于是，他们评估了来那度胺对iNKT细胞的激活影响。

令人惊喜的是，尽管来那度胺不能直接刺激iNKT细胞，但能显著增加IFN-γ和IL-2的产生。此外，在没有α-GalCer的情况下，用MM1S.CD1d细胞培养iNKT细胞时，来那度胺也会增加IFN-γ和IL-2的产生。种种迹象表明，来那度胺上调了iNKT细胞体内抗肿瘤活性。

最后，研究人员关注了iNKT细胞对MM细胞的杀伤力。令人欣慰的是，结果表明，来自不同患者的iNKT细胞都对α-GalCer负载的MM细胞表现出很强的细胞毒性；而在无α-GalCer的情况下，细胞毒性水平较低。这更证明了iNKT细胞疗法对骨髓瘤具有良好的疗效。

总而言之，iNKT细胞疗法对于多发性骨髓瘤具有良好的治疗潜力，并且能够与传统免疫治疗药物来那度胺联用，为更多的MM患者缓解痛苦、带来福音。

 

来源：

微信公众号: 基因启明

参考文献：

Song W, van der Vliet HJ, Tai YT, Prabhala R, Wang R, Podar K, Catley L, Shammas MA, Anderson KC, Balk SP, Exley MA, Munshi NC. Generation of antitumor invariant natural killer T cell lines in multiple myeloma and promotion of their functions via lenalidomide: a strategy for immunotherapy. Clin Cancer Res. 2008 Nov 1;14(21):6955-62. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-07-5290. PMID: 18980990; PMCID: PMC2967459.